瓠瓜ISSR-PCR反应体系优化

摘要

利用正交设计L9(34),对瓠瓜ISSR-PCR反应体系的4因素(dNTP、引物、Mg2+、Taq酶)在3水平上进行优化试验,建立适合瓠瓜ISSR-PCR反应体系,结果表明,在25 μL反应体系中,含1×PCR buffer、200 μmol·L-1dNTP、0.5 μmol·L-1引物、2.5 mmol·L-1MgCl2、30 ng模板DNA、0.75 U的Taq酶为最佳处理;通过PCR梯度测验,瓠瓜ISSR扩增适宜的退火温度比Tm值高2～6℃.