缓症链球菌致热性外毒素蛋白的生化性质

摘要

目的研究缓症链球菌外毒素蛋白的分子量、等电点、氨基酸组成及N-末端序列。方法将纯化的毒素蛋白用SDS-PAGE电泳，据低分子量标准蛋白质算出其相对分子质量；以微型聚丙烯酰胺等电聚焦(miniIEF)法进行此毒素蛋白的等点电测定；采用电印迹将SDS-PAGE电泳胶上的毒素蛋白转移到PVDF膜上，用Beckman344HPLC仪测定外毒素蛋白的氨基酸组成；用自动化蛋白质序列仪测定缓症链球菌外毒素N-末端氨基酸序列。结果缓症链球菌外毒素蛋白的相对分子质量为34000；测定毒素蛋白的等点电为6.2，是一种偏酸性蛋白；外毒素蛋白由17种氨基酸组成，其中谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、门冬氨酸、赖氨酸、缬氨酸等氨基酸含量较高；缓症链球菌外毒素蛋白N-末端氨基酸序列为：VSNLSRGMGA，本毒素N-末端氨基酸序列与β溶血链球菌外毒素蛋白(SPEA、SPEB、SEPC)N-末端氨基酸序列不同。结论此外毒素蛋白的分子量、等电点、氨基酸组成和末端氨基酸序列均与其他β溶血性链球菌外毒素不同，可能是一种新的链球菌致热性外毒素。