重组汉坦病毒包膜糖蛋白G1、G2基因体内外表达的评价

摘要

目的构建分别编码汉坦病毒浙37(Z37)株包膜糖蛋白G1、G2的真核表达质粒,并在离体及活体内评价重组汉坦病毒(HV)包膜糖蛋白G1、G2基因的表达.方法将编码G1、G2的基因片段分别插入至真核表达载体pcDNA3.1(+),获重组质粒pcDNA3.1-G1、pcDNA3.1-G2.在体外转录翻译系统和真核细胞中表达重组基因,并在BALB/C小鼠中评价包膜糖蛋白G1、G2所激发的特异性体液免疫应答效果.结果重组质粒pcD-NA3.1-G1、pcDNA3.1-G2转染COS-7细胞后,IFA法可检测到细胞内有特异性荧光分布;在体外蛋白质转录、翻译系统,重组质粒pcDNA3.1-G1、pcDNA3.1-G2所表达的蛋白质分子量分别约为70KD及55KD;在免疫的部分小鼠体内可检测到特异性抗体.结论成功地构建了分别编码HV Z37株包膜糖蛋白G1、G2的重组质粒,并能在体内外表达.