喉肿瘤相关成纤维细胞促进原代喉鳞状细胞癌细胞体外生长

摘要

目的 验证喉肿瘤相关成纤维细胞(cancer associated fibroblasts,CAFs)对原代培养的喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)细胞的体外生长是否有促进作用.方法 选取20例喉癌临床标本进行原代培养,将生长出的原代喉癌细胞中的CAFs通过差速消化法去除后继续单独培养,相差显微镜观察喉癌细胞在传代培养过程中的形态学变化,流式细胞仪检测喉癌细胞在传代过程中凋亡细胞比例的变化,Western blot检测喉癌细胞在传代过程中凋亡蛋白Caspase 3表达水平的变化,以始终与CAFs共培养传代的喉癌细胞作为对照.结果 与CAFs分离后喉癌原代细胞在体外传代培养过程中生长活性很快下降,多数在3代以内停止生长.相差显微镜观察到形态学上凋亡漂浮的喉癌细胞逐代增多,流式细胞仪检测到的凋亡细胞比例逐代增加,Western blot检测到的Caspase 3表达水平逐代增加;而始终与CAFs共培养生长的LSCC细胞在传代过程中生长活性却无明显下降(P＜0.05).结论 喉肿瘤相关成纤维细胞对体外原代培养的LSCC细胞的生长具有明显的促进作用.