三种提取前处理方法对金属检材DNA分型的影响

摘要

目的 探索一种适合于提取小尺寸金属检材上DNA的前处理方法.方法 选择M4型螺丝钉作为本研究的对象,经消毒去污处理,通过手握方式使人体脱落细胞覆盖于其表面,DNA提取前对螺丝钉分别采用三种不同的前处理方法(方法1:直接浸泡载体;方法2:震荡洗涤载体;方法3:二步擦拭载体),对经提取并纯化的样本采用Amicon Ultra-0.5超滤膜浓缩.结果 方法2获得的STR分型谱带均一、平衡性好,等位基因峰值面积和检出率均显著高于方法1和方法3提取组;方法3提取组整体峰值面积较低,大部分测试样本STR分型存在等位基因丢失和非特异性扩增现象;方法1提取组中的样本基本未获得有效的STR分型谱带.结论对尺寸较小、形状不规则的金属检材,如螺丝钉帽、铜丝铁线、铁珠铁片等,可采用方法2进行前处理,富集其上脱落细胞而后进行DNA提取,获得的DNA分型结果较为理想,方法1对检材DNA的提取前处理方式不宜采用.