蜜蜂α-葡萄糖苷酶的分离纯化及其酶学性质研究

摘要

本研究以蜜蜂腹部为材料,通过研磨进行组织破碎,然后硫酸铵沉淀、High Q离子交换层析、疏水作用层析和Superdex G-75凝胶层析,得到的α-葡萄糖苷酶在SDS-PAGE上呈单一蛋白质条带,分子量约为55kDa.以4-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物,研究酶催化反应动力学,结果表明:α-葡萄糖苷酶的最适反应pH范围为5.0～6.0,而pH稳定性范围为5.0～10.0.该α-葡萄糖苷酶的热稳定性比较差.其最适反应温度范围在35～45℃内.Zn2+、Mg2+、Mn2+和Fe2+对α-葡萄糖苷酶有激活作用.而Cu2+和Co2+对α-葡萄糖苷酶有抑制作用.酶动力学参数Km和Vmax分别为0.183mmol/L和0.085 mol/min·mg.