草酸青霉果胶酶分离纯化工艺及酶学性质研究

摘要

为了探索从鹅肠道分离的草酸青霉(Penicillium oxalicum)发酵生产果胶酶分离纯化新工艺,通过硫酸铵分级盐析、Sephacryl S-200分子筛柱层析、DEAE-Sephadex A-50离子交换层析技术对其发酵产物进行分离纯化,得到果胶酶的主要组分半乳糖醛酸酶(PG)和果胶酯酶(PE),并分别对PG和PE的最适作用pH值、温度以及分子质量等酶学特性进行研究.结果表明:PG和PE纯化倍数分别为32.21和23.98,均达到电泳纯,分子质量分别为61.4kD和42.2kD.PG最适作用pH值为5.0,最适反应温度为40℃,pH值稳定范围为4.0～6.0,在30、40℃随着处理时间延长酶活力保持稳定.PE最适作用pH值为6.0,最适温度为50℃,pH值稳定范围为5.0～7.0; PE在30℃时的热稳定性较好,40℃时处理60min,酶活力变化不明显.