正交试验优化黑果悬钩子茎、叶总黄酮的提取纯化及其抗氧化活性

摘要

利用单因素试验和正交试验优化了黑果悬钩子(Rubus caesius L.)茎和叶总黄酮的提取工艺,通过清除DPPH自由基、ABTS+·的方法测定了黑果悬钩子茎和叶的抗氧化活性.优化的总黄酮提取工艺为:提取温度80℃、提取时间70 min、乙醇溶液体积分数60％、料液比1∶90 (g/mL).通过比较AB-8等14种大孔树脂对黑果悬钩子茎、叶总黄酮的吸附分离效果,从中筛选出AB-8大孔树腊是理想的吸附剂.通过单因素试验,确定AB-8大孔树脂对黑果悬钩子总黄酮分离纯化的最优工艺为:上样流速1 mL/min、上样液总黄酮质量浓度0.32 mg/mL、上样体积80 mL,吸附饱和平衡后,以40 mL 60％乙醇溶液1.5 mL/min的流速动态洗脱.经AB-8大孔吸附树脂纯化后,提取液的总黄酮含量和抗氧化能力显著提高,叶和茎总黄酮含量为纯化前的1.4倍和2.4倍,叶和茎的的ABTS+·清除能力分别为纯化前的1.7倍和2.5倍,DPPH自由基清除能力分别为纯化前的1.7倍和2.6倍.这些结果表明:黑果悬钩子叶和茎均具有较高的总黄酮含量和明显的抗氧化活性,是潜在的天然抗氧化剂资源.