Caulobacter crescentus蔗糖水解酶突变体S271A的重组表达及其转化蔗糖制备松二糖的研究

摘要

松二糖具有低热量和不致龋齿的特性,在食品工业具有广泛的应用前景。与淀粉蔗糖酶相比,Caulobacter crescentus蔗糖水解酶突变体S271A (CcSH S271A)转化蔗糖过程中产生的麦芽寡糖副产物少,可代替淀粉蔗糖酶用于松二糖制备。该研究将CcSH S271A在枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)中重组表达,对该重组酶进行酶学表征并对其制备松二糖的工艺进行了优化。结果表明,重组酶的酶促反应最适温度为45℃,最适pH为8.0,在30℃时热稳定性好,半衰期为312 h。当底物蔗糖浓度为2.0 mol/L,温度30℃、pH 8.0、加酶量为60 U/g蔗糖,反应时间48 h时,松二糖最高产率达到66.3%。是以蔗糖为单一底物制备松二糖的最高水平,为松二糖的制备奠定了基础。