高效阴离子交换色谱法分析杜氏盐藻多糖的单糖组成

摘要

选用CarboPac PA20分析柱(3 mmi.d.×150 mm),以H2O-250 mmol/L NaOH-1 mol/L NaAc为流动相,建立了三元梯度洗脱分离、积分脉冲安培检测多糖中常见的8种中性单糖和2种糖醛酸的高效阴离子交换色谱分析方法;利用离子交换色谱柱(DEAE Sepharose CL6B fast flow,3.5 cm×30 cm)和凝胶过滤色谱柱(Sepharose CL6B,2.6 cm×100 cm)从提取出β-胡萝卜素的杜氏盐藻残渣中分离出PD1、PD2、PD3、PD4a和PD4b共5个多糖级分,选用适当的条件水解后,利用高效阴离子交换色谱法测定了各多糖级分的单糖组成.其中具有显著生物活性的多糖级分PD4a中主要含有半乳糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、盐藻糖及鼠李糖6种中性糖,还含有少量糖醛酸;PD4b中主要含有核糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖及木糖5种中性糖,不合糖醛酸.该结果与PMP柱前衍生化反相高效液相色谱法测定的单糖摩尔比基本一致.10种单糖的离子色谱法的检出限为0.76～2.92nmol/L(以3倍信噪比计),峰面积相对标淮偏差RSD为0.72%～3.25%.