原生质体紫外诱变选育L-半胱氨酸高活力转化菌株

摘要

对Pseudomonas sp.HJ-14的原生质体制备和再生条件进行了研究,并对其原生质体紫外辐照诱变选育L-半胱氨酸高活力转化菌株.在37℃、2 mg/mL溶菌酶作用下酶解60 min,其原生质体的形成率和再生率分别为78.6%和28.6%.经过紫外辐照诱变Pseudomonas sp.HJ-14原生质体,在含DL-2-氨基-△2-噻唑啉-4-羧酸(DL-ATC)再生平板上筛选抗性菌株,获得1株酶活较高的正突变株B-3,该菌株具有良好的遗传稳定性和酶活稳定性.采用5L罐进行产酶培养,并在pH8.0、DL-ATC·3H2O浓度为10 g/L、42 ℃酶促反应9 h,L-半胱氨酸最高产量达4.63 g/L,摩尔转化率为76.5%,较HJ-14提高了117.7%.