基于微滴数字PCR技术鉴别猪肉掺假方法的建立及评估

摘要

探讨微滴数字PCR (Droplet digital PCR,ddPCR)技术在猪肉掺假检测中的应用价值.提取猪肉肌肉组织中的基因组DNA,设计猪源性内标基因引物及探针序列,以ddPCR进行扩增读取结果,在不同物种中进行特异性检测,利用标准质粒DNA检测最低下限拷贝浓度;在不同掺杂量组织中检测最低比例.结果 表明,猪源性ddPCR检测体系特异强,在10～2000 copies/μL的范围内具有较高的检测线性,RSD值小于25％,可检测至猪肉掺杂量为1％的混合样品.基于ddPCR的检测猪肉掺假的方法具有较高的实际应用价值.