YAP蛋白磷酸化参与二甲双胍抑制乳腺癌MCF-7细胞生长

摘要

目的验证二甲双胍在人乳腺癌MCF-7细胞中的细胞增殖的影响,并探讨二甲双胍在乳腺癌中介导的抗肿瘤活性的潜在分子靶标。方法使用含或不含二甲双胍的培养基MCF-7细胞,使用血细胞计数器进行计数。通过CCK-8方法检测不同浓度的二甲双胍对细胞增殖的影响,并获取半数抑制浓度(IC50),并以此浓度进行后续实验研究。使用实时荧光定量Real-time PCR检测目的基因的表达。使用蛋白印迹法检测目的蛋白LATS1、STK4、YAPl、磷酸化YAPl(p-YAPl)的表达情况。结果二甲双胍呈剂量依赖性抑制MCF-7细胞的增殖,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。二甲双胍抑制MCF-7细胞增殖IC50浓度为40 mmol/L。二甲双胍处理组细胞YAP、LATS1、SKT4的mRNA表达上调,YAPl蛋白表达量下调,p-YAPl蛋白表达量升高,提示YAP被磷酸化。结论二甲双胍可抑制人乳腺癌MCF-7细胞的增殖,且抑制率随浓度及时间增加。其机制可能与YAP蛋白磷酸化有关。