基于网络药理学和实验验证探讨表没食子儿茶素没食子酸酯抑制乳腺癌细胞迁移的作用机制

摘要

目的筛选抑制乳腺癌转移的中药活性化合物,探究其抑制乳腺癌细胞迁移的作用机制。方法在GeneCards、OMIM等数据库中检索与“乳腺癌转移”相关的靶点;通过TCMSP数据库检索并筛选出潜在的靶向乳腺癌转移的中药活性化合物;利用DAVID数据库对乳腺癌转移相关靶点进行GO富集分析及KEGG通路分析;利用Cytoscape 3.7.1构建与分析乳腺癌转移相关靶点的蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络及“成分-靶点-通路”网络;通过体外细胞实验及western blot实验探究抑制乳腺癌转移的潜在中药活性化合物对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的作用及相关机制。结果通过数据库挖掘共获得乳腺癌转移相关靶基因11个,与其对应的潜在中药活性化合物1584个。GO富集分析以及KEGG通路分析结果表明,中药活性化合物抑制乳腺癌转移的相关靶点主要涉及信号转导、转录正调控等生物过程,蛋白结合、酶结合等分子功能;细胞核等细胞组分,以及MAPK、PI3K-Akt等信号通路。MTT、细胞划痕实验和Transwell实验结果发现,表没食子儿茶素没食子酸酯、槲皮素和木犀草素等能明显抑制MCF-7、MDA-MB-468细胞的增殖、迁移及侵袭;Western blot实验结果表明,表没食子儿茶素没食子酸酯能明显抑制MDA-MB-468细胞的ERK1/2的Thr202/Tyr204位点的磷酸化、降低EGFR的表达水平,说明表没食子儿茶素没食子酸酯可能通过调控EGFR/MAPK信号通路抑制乳腺癌迁移。结论通过网络药理学方法挖掘抑制乳腺癌转移的中药活性化合物及潜在作用机制,为中医药防治乳腺癌转移的机制研究提供科学依据。