不同浓度Netrin-1对人滋养细胞株TEV-1增殖凋亡的影响研究

摘要

目的探讨不同浓度Netrin-1对滋养细胞株TEV-1增殖凋亡的影响。方法行经0、10、100及1 000 ng/ml Netrin-1干预TEV-1 24 h后,采用噻唑兰MTT比色法检测细胞增殖指数、流式细胞法检测细胞凋亡率,采用免疫荧光组织化学方法鉴定TEV-1表达Netrin-1情况,采用实时定量PCR及western印迹分别检测各组细胞Netrin-1mRNA及蛋白变化情况。结果以递增浓度的Netrin-1预处理TEV-1细胞24 h后,TEV-1细胞增殖行为无影响,但TEV-1细胞凋亡率随Netrin-1浓度增加而降低,当Netrin-1刺激浓度达1 000 ng/ml时,TEV-1细胞总凋亡率下降至(6.63±0.07)%,较空白组(0 ng/ml)凋亡率(14.44±0.85)%下降明显(P<0.01)。Netrin-1表达于滋养细胞细胞质。在培养的滋养细胞株TEV-1中加入不同剂量的Netrin-1干预24 h后,TEV-1 Netrin-1蛋白表达水平无明显变化。结论 Netrin-1能明显降低滋养细胞的凋亡程度,期间涉及机制与滋养细胞Netrin-1表达水平无关。