不同浓度催乳素对人早孕滋养层细胞增殖、迁移和侵袭功能的影响

摘要

研究目的：探讨不同浓度催乳素(PRL)对人早孕绒毛外滋养细胞株HTR-8\Snveo增殖、迁移和侵袭功能的影响。
　　研究方法：1.本研究以人早孕绒毛外滋养细胞株HTR-8\Snveo细胞作为研究对象，按催乳素干预剂量的不同，实验分为3组:空白组(0ng/mL)、低浓度PRL(10ng/mL)刺激组、高浓度PRL(100ng/mL)刺激组。2.通过应用细胞划痕修复实验、transwell小室侵袭实验来探讨PRL是否对HTR-8\Snveo细胞迁移和侵袭功能有影响。3.利用CCK-8比色法检测不同浓度PRL干预处理24小时后各组实验细胞的增殖活力。4.采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和双抗体夹心ELISA法分别从mRNA和蛋白水平检测本实验浓度范围内的PRL干预处理后各组实验细胞的表达和分泌与侵袭密切相关的标志物MMP-2和E-cad情况。
　　研究结果：1.细胞划痕修复实验结果显示各组实验细胞迁移修复率(％)分别为28.02±0.75、37.80±0.42、42.12±0.31，经方差分析，各组之间的差异具有统计学意义（P均＜0.05）。2.Transwell小室侵袭实验检测结果显示:与对照组(100±6.56)相比，经10 ng/mL、100 ng/mL浓度PRL孵育24h后的HTR-8/SVneo细胞的侵袭指数（分别为142.68±4.91、189.59±4.10，P均＜0.05）明显升高，且HTR-8/SVneo细胞随PRL浓度的增加侵袭指数也随之升高，差异具有统计学意义。3.CCK-8法检测各组细胞增殖能力，所测结果数据显示，对照组OD值为1.08±0.04，实验组分别为1.09±0.05、1.13±0.06，P均＞0.05，差别无统计学意义。4.RT-PCR及Elisa实验数据分析结果显示，与对照组比较，不同浓度的PRL均能显著上调MMP-2的mRNA及蛋白表达水平(P均＜0.05），下调E-cad的mRNA及蛋白表达水平（P均＜0.05），并呈现浓度依赖效应。
　　研究结论：1.在本实验浓度范围内，PRL可促进HTR-8/SVneo细胞体外迁移、侵袭能力，且随着PRL浓度升高其迁移、侵袭能力随之增强。2.不同浓度的PRL(0、10、100ng/mL)对HTR-8\SVneo细胞的增殖活力无影响。3.实验浓度范围内的PRL均能上调MMP-2的mRNA及蛋白表达水平，而下调E-cad的mRNA及蛋白表达水平，从而促进HTR-8/SVneo细胞的迁移、侵袭功能。

目录

声明

个人简历

摘要

前言

1．实验细胞与试剂材料

2．HTR-8／Sneo细胞株的培养及处理

3．细胞迁移能力检N(N痕修复实验)

4．Transwell体外侵袭实验

5．CCK-8法测细胞增殖活力

6．实时荧光定量PCR实验流程

7．ELISA法测定

8．统计分析

结果

1 不同浓度PRL对HTR-8／SVneo细胞迁移修复率的影响

2 不同浓度PRL对HTR-8／SVneo细胞体外侵袭能力的影响

3 不同浓度PRL对HTR-8／SVneo细胞增殖活力的影响

4 不同浓度PRL对HTR-8／SVneo细胞表达MMP-2、E-cad的影响

讨论

一、催乳素与滋养细胞的增殖

二、MMP-2、E-cad与滋养细胞侵袭功能相关

结论

参考文献

中英文缩略词对照表

综述 催乳素及其对女性生殖的作用

致谢

攻读学位期间发表的学术论文