细胞因子对人早孕滋养层细胞与卵巢癌细胞系HO-8910侵袭性影响的比较研究

摘要

目的在体外培养原代人早孕滋养层细胞及卵巢癌细胞系HO-8910细胞的基础上,观察4种外源性细胞因子对人早孕滋养层细胞及HO-8910细胞的效应,比较细胞因子对两种细胞在基因表达水平、蛋白表达水平以及细胞水平侵袭能力的影响.方法早孕绒毛组织取自(6~8周)自愿人工流产的健康早孕妇女,由南方医院妇产科提供.采用绒毛组织贴块培养法进行原代早孕滋养层细胞的培养,并鉴定和纯化原代早孕滋养层细胞.培养卵巢癌细胞系HO-8910细胞.分别以EGF、TNF-α、IL-1α、IL-10刺激培养细胞48小时,用RT-PCR检测各侵袭相关基因MMP-2、MMP-9、MTA1、KAI1 mRNA的表达,细胞ELISA法检测蛋白MMP-2和CD44v6的表达,利用Matrigel膜侵入培养系统,采用染色和显微镜下细胞计数的方法,对穿透Matrigel膜的细胞进行定量分析,记录各项检测指标的数据,经统计学分析,比较两种细胞在体外侵袭性的异同.结论:1.人早孕滋养层细胞表达MTA1和KAI1 mRNA以及CD44v6,提示它们可能与滋养层细胞的侵袭调节有关,进一步说明滋养层细胞的侵袭行为与肿瘤细胞的相似性.2.EGF、TNF-α、IL-1α、IL-10对人早孕滋养层细胞及卵巢癌细胞系HO-8910细胞的侵袭调控效应存在差异.3.在体外早孕滋养层细胞的侵袭穿透力强于卵巢癌细胞系HO-8910细胞.

目录

英文缩略词表

前言

第一部分细胞因子对人早孕滋养层细胞及卵巢癌细胞系HO-8910侵袭相关基因mRNA表达的影响

材料与方法

结果

一、细胞因子对早孕滋养层细胞mRNA-2、mRNA-9、MTA1、KAI1mRNA表达的影响

二、细胞因子对卵巢癌细胞系HO-8910细胞mRNA-2、mRNA-9、MTA1、KAI1 mRNA表达的影响

讨论

一、MMP-2、MMP-9、MTA1、KAI1基因的表达与细胞侵袭性的关系

二、EGF对两种细胞侵袭相关基因mRNA表达的影响

三、TNF-α对两种细胞相关基因mRNA表达的影响

四、白介素-1α对两种细胞侵袭相关基困mRNA表达的影响

五、白介素-10对两种细胞侵袭相关基因mRNA表达的影响

第二部分细胞因子早孕滋养层细胞及卵巢癌细胞系HO-8910侵袭相关蛋白表达的影响

材料与方法

结果

一、细胞因子对早孕滋养层细胞MMP-2、CD44v6表达的影响

二、细胞因子对HO-8910细胞MMP-2、CD44v6表达的影响

讨论

一、MMP-2、CD44v6与细胞侵袭性的关系

二、EGF、TNF-a、IL-1a和IL-10对人早孕滋养层细胞的影响

三、EGF、TNF-a、IL-1a和IL-10对HO-8910细胞的影响

四、早孕滋养层细胞和HO-8910细胞对细胞因子反应的异同

第三部分细胞因子对早孕滋养层细胞及卵巢癌细胞系HO-8910体外侵袭穿透力的影响

材料与方法

结果

一、不同浓度TNF-α对原代人早孕滋养层细胞体外侵袭穿透力的影响

二、不同浓度TNF-α对卵巢癌细胞系HO-8910细胞体外侵袭穿透力的影响

三、不同浓度EGF对卵巢癌细胞系HO-8910细胞体外侵袭穿透力的影响

讨论

一、正常培养条件下两种细胞体外侵袭穿透力的比较

二、细胞因子对两种细胞侵袭穿透力的影响

附图与说明

全文小结

参考文献

综述

致谢

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