蜡样芽孢杆菌M22Fe-SOD基因克隆及其分析

摘要

通过筛选蜡样芽孢杆菌M 22基因组文库,得到约3.9 kb的基因组片段。BLAST结果显示:其中包含1条长度为915 bp、编码304个氨基酸的超氧化物歧化酶(SOD)基因,其与Bacillus thuringiensis和Bacillus anthracis中的sodF基因同源性高达95%。此sodF基因能互补恢复大肠杆菌SOD缺陷型菌株QC871在10μmol/L paraquat中的生长能力。对重组表达蛋白的抑制实验表明,此SOD基因为Fe-SOD。利用pET-30b(+)构建表达载体pET-sodF并转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导后,SOD融合蛋白表达量显著增加。构建自杀载体p299-8,同源重组突变蜡样芽孢杆菌M 22sodF基因后,突变体抗氧化能力未显著降低。