鸡γ-干扰素基因原核表达及多抗血清的制备

摘要

将扩增的鸡γ-干扰素基因(CHIFN-γ)克隆至原核表达载体pET30a上,构建了重组表达质粒pET-30a-CHIFN-γ。将其转入大肠杆菌BL21(DE3)中,于37℃不同时间诱导表达,经SDS-PAGE分析表明该蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达,且以可溶蛋白的形式存在。蛋白通过镍离子亲和树脂进行纯化,并作为免疫原制备兔抗CHIFN-γ多抗血清。Western-blotting结果表明目的蛋白与多抗血清有免疫反应性。