人LIF基因的克隆及其真核表达载体的构建

摘要

目的克隆白血病抑制因子(LIF)基因,测定其序列,构建带LIF基因的真核表达载体。方法通过逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法从正常妊娠的子宫蜕膜组织中克隆LIF基因,与T载体连接,再酶切T-LIF载体,获得LIF基因,然后将其与质粒PCDNA3.1(+)连接,构建PCDNA3.1(+)-LIF真核表达载体。结果经酶切和DNA测序证明LIF基因序列正确,载体构建成功。结论成功克隆了LIF基因,构建了PCDNA3.1(+)-LIF真核表达载体,为LIF在相应真核细胞内表达及LIF蛋白的分离纯化奠定了基础。