单纯疱疹病毒I型Stocker株糖蛋白G基因在PBV221原核表达载体的表达与纯化

摘要

目的:构建I型单纯疱疹病毒型特异性包膜糖蛋白G基因片段的表达载体,进行原核表达,并纯化目的蛋白。方法:用PCR法扩增HSV1-gG强抗原决定簇的基因片段,将该段基因克隆于PBV221表达载体,转化大肠杆菌DH5α,温控诱导目的蛋白表达,表达产物以包涵体形式存在,用SDS-PAGE和Westernblot鉴定目的蛋白,经离子交换纯化获得较纯的目的蛋白。结果:获得了重组的原核表达载体及相对分子质量为14.7kD的重组蛋白,并纯化获得了纯度大于90%的目的蛋白抗原。结论:成功克隆和表达了高纯度的HSV1-gG蛋白。