犬附红细胞体唾液酸糖蛋白内肽酶osgep基因的原核表达、纯化方法和应用

摘要

本发明涉及一种犬附红细胞体唾液酸糖蛋白内肽酶osgep基因的原核表达、纯化方法，步骤如下：⑴设计扩增osgep基因的特异性引物；⑵PCR扩增获得osgep基因片段并纯化；⑶将osgep基因片段中三联密码子为TGA处点突变为TGG；⑷将突变后的osgep基因连接至原核表达载体，构建重组表达质粒；⑸重组表达载体的原核表达以及表达形式的检测；⑹纯化osgep重组蛋白。本发明方法将犬附红细胞体的唾液酸糖蛋白内肽酶osgep基因进行原核表达并纯化得到纯度高的osgep蛋白，此蛋白可用于制备多抗血清、单克隆抗体，也可作为抗原包被酶标板，从而为犬附红细胞体血清学检测方法的建立奠定基础。