Cdc42基因在表皮生长因子促进HepG2细胞丝状伪足形成中的作用

摘要

目的:探讨表皮生长因子(EGF)对HepG2细胞丝状伪足形成和细胞体外侵袭能力的影响以及细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)在其中的作用.方法:将Cdc42siRNA转染HepG2细胞株,RT-PCR和Westernblot检测EGF组、EGF+siRNA干扰组、siRNA干扰组及空白对照组细胞Cdc42mRNA转录以及蛋白的表达水平,微丝绿色荧光探针(actin-trackergreen)染色检测HepG2细胞丝状伪足形成,侵袭小室检测细胞体外侵袭能力.结果:经EGF处理后HepG2细胞可见明显丝状伪足形成,EGF组细胞内Cdc42mRNA及总蛋白(Total-Cdc42)表达量无显著变化,但活性Cdc42(Active-Cdc42)显著增高(0.713±0.021vs0.423±0.015,P<0.05),siRNA干扰组Cdc42表达及活性受到明显抑制(0.118±0.017vs1.128±0.024;0.351±0.021vs0.936±0.024,均P<0.05),并抑制EGF诱导的细胞丝状伪足形成,EGF组细胞体外侵袭能力显著高于其余各组(98.43±3.11vs61.09±3.58,50.53±2.34,62.73±2.64,均P<0.05).结论:EGF通过激活Cdc42诱导HepG2细胞丝状伪足形成并增强其体外侵袭能力.