血管生成素对人毛囊外毛根鞘角质形成细胞增殖的影响

摘要

目的:探讨血管生成素对体外培养的人毛囊外毛根鞘角质形成细胞增殖的影响。方法:采用两步酶消化法分离和培养人毛囊外毛根鞘角质形成细胞,将与绿色荧光蛋白基因共表达的血管生成素真核表达质粒pEGFP-ANG转染人毛囊外毛根鞘角质形成细胞,同时设立转染空质粒的pEGFP-C2组和只加转染液的阴性对照组,48 h后利用ELISA法检测细胞上清液中血管生成素的表达,同时四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖。另外,将不同浓度的重组人血管生成素(0～200μg/L)加入人毛囊外毛根鞘角质形成细胞中,培养48 h后MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期。结果:成功分离与培养了人毛囊外毛根鞘角质形成细胞,转染人血管生成素的细胞上清液中血管生成素的浓度明显高于转染pEGFP-C2组和阴性对照组(P<0.001),且其能够明显促进人毛囊外毛根鞘角质形成细胞增殖(P<0.001)。另外,3.125～200.000μg/L重组人血管生成素能够明显促进人毛囊外毛根鞘角质形成细胞增殖(P<0.001),其中以12.500μg/L浓度组作用最为显著。流式细胞仪检测结果表明12.500～200.000μg/L重组人血管生成素能够显著增加细胞增殖指数(P<0.05)。结论:内源性和外源性血管生成素均能明显促进体外培养的人毛囊外毛根鞘角质形成细胞增殖,提示血管生成素可能通过促进毛囊外毛根鞘角质形成细胞增殖而促进毛发生长。