携带小鼠白细胞介素2基因重组逆转录病毒载体介导的肝癌基因治疗研究

摘要

细胞因子转基因是目前肿瘤基因治疗研究最活跃的领域,其中IL-2基因转入肿瘤细胞的抗肿瘤效果最为肯定。IL-2基因转染后在肿瘤细胞中的表达水平与肿瘤细胞致瘤性丧失、抗亲代肿瘤能力呈正相关。In vivo 法基因治疗比ex vivo法更具有临床前景,但目前常用的逆转录病毒载体体内易感染和整合于分裂期体细胞中,有引起与放化疗机理类似的剐作用的危险。因此in vivo法基因治疗要求目的基因在肿瘤细胞中高效特异表达。 1 材料和方法 1.1基因与载体:pSP65MIL-2质粒购自比利时Gent大学;pMNSM、pMNSM-TK-LacZ、Albe/p in Bluscripts质粒及HB101、JM109宿主菌,见文献。鸡β-actin cDNA由日本奈良医科大学Kuriyama博士赠送。 1.2动物与细胞株:BALB/c和C57BL/小鼠,3月龄,购于本校实验动物中心。PA317、NIH3T3TK-、MM45T.Li、MH134、BNLIME、B16、S180细胞株见文献,Psi2包装细胞由日本奈良医科大学Ku-riyama博士赠送。IL-2生物活性检测细胞CTLL-2引自波士顿大学。