丹参多酚酸盐抑制库普弗细胞活化减轻肝脏再灌注损伤

摘要

目的研究丹参多酚酸盐(SV)对肝脏缺血再灌注(IR)损伤的保护作用及其机制。方法选择健康、雄性的C57BL/6小鼠24只,随机分为假手术组、0.9%氯化钠溶液(NS)组和SV组,每组8只。假手术组小鼠仅接受开腹及关腹操作,NS组和SV组小鼠建立IR模型。IR术前1h,SV组小鼠经尾静脉注射SV60mg/kg,NS组小鼠注射等量NS。再灌注6h,检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平,并观察肝组织形态学的变化。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)及荧光定量反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测血清及肝组织内肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6的表达水平;应用免疫组织化学技术检测各组肝脏标本内库普弗细胞特异性抗原F4/80的表达情况,采用荧光定量RT-PCR检测库普弗细胞表面分子CD11bmRNA的表达水平。分离小鼠腹腔巨噬细胞,以脂多糖(LPS)作为活化剂,TNF-α作为巨噬细胞活化指标,检测体外培养体系中SV能否抑制巨噬细胞活化。结果与NS组相比,SV组再灌注6h的血清ALT、AST水平显著降低(P值均<0.01),血清TNF-α和IL-6表达水平显著降低(P值分别<0.05、0.01),肝组织内TNF-αmRNA和IL-6mRNA表达水平亦显著降低(P值均<0.05),肝组织内F4/80阳性库普弗细胞的浸润显著减少(P<0.05),肝组织内库普弗细胞表面分子CD11bmRNA的相对表达水平显著降低(P<0.05)。SV体外抑制腹腔巨噬细胞活化实验显示,SV组的上清液内TNF-α水平显著低于NS组(P<0.05)。结论 SV对肝脏IR损伤具有保护作用,其机制可能与抑制肝脏再灌注后库普弗细胞的活化有关。