人类肥胖基因瘦素蛋白的原核表达

摘要

目的 :原核表达人类肥胖基因瘦素蛋白。方法 :以携人类肥胖基因的 p UC119- ob为模板 ,PCR扩增瘦素蛋白基因片段 ,并克隆到 p ET- 32 a构建重组表达质粒 p ET- 32 a- ob,经酶切和测序鉴定后 ,转化至大肠埃希菌 DH5 α中表达 ,SDS- PAGE电泳鉴定表达产物。结果 :测序和限制性分析均证明了 p ET- 32 a- ob的序列正确 ,转化的 DH5 α可高效表达一个 30 k D融合蛋白 ,与预期结果一致。结论 :经 p ET- 32 a- ob转化的DH5 α可有效表达重组人类瘦素蛋白 。