人胎肝干细胞体外感染乙型肝炎病毒模型的建立

摘要

目的建立一种稳定的基于人胎肝干细胞的维持乙型肝炎病毒（HBV）复制和传代的体外细胞培养模型,为深入研究乙肝病毒的生命周期和发病机制提供必要的工具。方法原代分离12-20周胎龄的胎肝干细胞,用乙肝病毒阳性血清感染胎肝干细胞;荧光定量PCR追踪检测细胞上清和细胞内乙肝病毒DNA及细胞内乙肝病毒复制中间体—闭合环状双链DNA（cccDNA）;化学发光法检测HBsAg、HBeAg分泌情况;免疫细胞化学法鉴定HBcAg表达情况;原位杂交检测细胞内病毒DNA。结果在经HBV感染的细胞上清液中可持续检测出乙肝病毒DNA、HBsAg和HBeAg,细胞内可检测出HBV-cccDNA和HBcAg。结论乙肝病毒可感染胎肝干细胞,并在细胞内增殖、分泌、传代,这一模型可模拟乙肝病毒自然感染人体的病理生理过程,为HBV感染机制研究和抗病毒药物的研发提供了必要的工具。