大鼠P450侧链裂解酶抗原决定簇多参数预测及合成

摘要

目的预测大鼠P450侧链裂解酶(P450scc)的抗原表位,确定合成肽序列,并合成八分枝肽,制备多克隆抗体。方法根据P450scc的氨基酸序列,采用GOLDKEY核酸及蛋白质分析软件,多参数预测P450scc的抗原表位,筛选并确定合成肽序列。采用的方案包括抗原性、Hopp&Woods亲水性、可及性、柔韧性、电荷分布参数、二级结构β转角和万氏综合表位参数方案。利用固相合成法,在Rink树脂上合成八分枝赖氨酸核心树脂,并在此基础上合成八分枝肽,用于制备抗体。结果将P450scc的羧基端16肽确定为合成肽序列(LKQDLGSTMPRKGDTV),约Mr8000。固相合成获得目的肽约30mg,经鉴定纯度达到90%以上。结论P450scc抗原表位预测及八分枝肽固相合成,为利用该合成肽制备抗体提供了一条简捷的途径。