麻疯树酰基载体蛋白的基因克隆、表达分析及原核表达

摘要

从麻疯树胚乳cDNA文库中筛选分离了一个编码酰基载体蛋白的cDNA序列,全长为806bp,其开放读码框(ORF)长度为393bp,编码130个氨基酸,该序列在GenBank登录号为EF179617,命名为JcACP.该基因编码的蛋白质相对分子质量(Mr)约为14.4×103,等电点为5.2,具有酰基载体蛋白的典型特征——含有4’-磷酸泛酰巯基乙胺辅基的结合位点.RT-PCR试验结果表明,该基因在麻疯树的叶、茎和种子中表达,以种子中的表达量最高,在根中不表达,种子萌发后其表达量随萌发进程递增,在96h时表达量达到最高.结果表明,JcACP在种子中的高度表达可能与种子萌发时的代谢活动有关.同时,将其在大肠杆菌中成功进行了原核表达.