环氧化酶2启动子调控促凋亡基因BAX在卵巢癌细胞系的特异性高表达

摘要

目的:验证环氧化酶-2(COX-2)启动子能调控下游基因特异性在COX-2阳性的卵巢癌细胞系高表达;并以CMV启动子为对照,分析COX-2启动子的转录效率。方法:构建重组质粒COX-2-BAX和CMV-Lue。脂质体介导分别把质粒phPES2,CMV—Lue瞬时转染COX-2阳性的卵巢癌细胞系SKOV-3和COX-2阴性的结肠癌细胞系SW480,检测荧光素酶报告基因的表达情况。同法把质粒COX-2-BAX、pcDNA3-BAX转染SKOV-3和SW480,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:成功构建重组质粒COX-2-BAX和CMV—Luc。COX-2-Lue转染SKOV3和SW480细胞24 h后报告基因活性分别为1554±86.5和53.7±10.9。CMV—Luc财法转染后,报告基因活性分别为9851.7±129.5和8831.0±167.3。COX-2-BAX转染SKOV-3和SW480细胞36 h后细胞凋亡率分别为10.4％,3.7％;CMV—BAX同法转染后,细胞凋亡率分别为21.7％,25.6％。结论:COX-2启动子可调控下游基因特异性地在COX-2阳性的卵巢癌细胞系中高表达,但转录效率明显低于CMV启动子。含COX-2启动子经合理修饰后可用于卵巢癌的基因治疗。