SMA基微孔膜固定化β-半乳糖苷酶的研究

摘要

以超临界二氧化碳(SCCO2)为分散介质在聚偏氟乙烯(PVDF)微孔膜表面和孔内进行马来酸酐和苯乙烯的接枝共聚,合成出超高分子量的苯乙烯/马来酸酐交替共聚物(SMA)基微孔PVDF膜。以SMA基PVDF膜为载体通过酸酐基和酶分子上的氨基偶联,制备出具有酶催活性的功能性分离膜。考察了影响酶固定化的因素,确定其最佳固定化条件为:温度,4℃;pH,8.2;酶/膜,1:10;反应时间,6h。固定化酶膜的最适温度为55℃,最适pH为7.8,均比自由酶稍高;Km(0.3mmol/L)与自由酶接近。固定化酶膜活力达13.5U/cm2膜,比活为280.0U/mg蛋白,蛋白载量为68.2μg/cm2膜,相对活力为89.0%。固定化酶膜表现出良好的操作稳定性和储存稳定性,SMA基PVDF微孔酶膜超滤制备低乳糖牛奶实验表明该技术应用前景广阔。