人骨髓多潜能成体祖细胞分化后细胞移植治疗兔心肌梗死

摘要

目的:体外分选纯化人骨髓多潜能成体祖细胞(MAPCs),诱导分化,观察其分化后细胞移植治疗心肌梗死的疗效,初步探讨MAPCs移植治疗心肌梗死的可行性。方法:取适量志愿者骨髓采用梯度密度离心法分离获取单个核细胞并行贴壁培养,将获取的细胞通过CD45、GlyA免疫微磁珠负分选(MACS)分离出MAPCs;锥虫蓝拒染试验测定分选后细胞活力,流式细胞仪鉴定分选后细胞纯度;传代后的细胞与10μmol.L-1浓度5-氮杂胞苷(5-aza)共孵育24 h,通过透射电镜对诱导后的细胞进行鉴定,并将诱导后的MAPCs移植于兔心肌梗死部位,观察其对兔心功能的改善情况。结果:MACS分选前后MAPCs细胞活力分别为(96.7±1.7)%(、96.0±2.4)%,无显著差异;获取的CD45-、GlyA-细胞纯度大于98%。分选后传代的MAPCs经5-aza诱导后,透射电镜检查可见大量的粗大肌丝;细胞移植治疗心肌梗死兔4周后,MAPCs移植组左室射血分数、左室侧壁运动幅度、左室收缩期室壁增厚率,以及左心室最大压力上升速率(dp/dt),均明显高于心梗模型组和空白对照组(P<0.05或0.01),但低于假手术组(P<0.05);空白对照组与心梗模型组相比无显著差异。结论:MACS分离出的高纯度人MAPCs在体外经5-aza诱导后能够向肌源性细胞分化,兔心梗区内植入诱导后的MAPCs能够改善心功能。