基质金属蛋白酶抑制剂-4在大肠杆菌中的克隆与表达

摘要

基质金属蛋白酶抑制剂 4(tissueinhibitorofmetalloproteinase 4,TIMP 4)为心脏特异性表达 ,在心脏代谢和肿瘤转移、侵袭过程中具有重要作用。为进一步研究其功能和作用机理 ,以PCR方法扩增人基质金属蛋白酶抑制剂 4不含信号肽的表达序列 ,测序鉴定正确后 ,构建原核重组表达质粒pMAL c2 TIMP 4,转化大肠杆菌 ,IPTG诱导阳性克隆 ,大量表达重组蛋白。细菌经超声破碎后 ,其上清中的重组蛋白经SDS PAGE初步鉴定分子量大小与理论值一致 ,为以后基质金属蛋白酶抑制剂