用生物素标记的cDNA探针检测马铃薯纺锤块茎类病毒

摘要

用生物素-11-dUTP通过缺口平移将克隆于pST-B5和pST-B14质粒中的马铃薯纺锤块茎类病毒(Potato spindle tuber viroid,PSTV)cDNA进行标记,制备了生物素标记的PSTV-cDNA探针,在硝酸纤维素膜上进行核酸斑点杂交(Nucleic acid spot hybridization,NASH),检测了提纯的PSTV-RNA,带有PSTV全序列的质粒及感染PSTV的马铃薯植株提取液,前两者可检出的最低含量分别为8pg/斑点和0.35pg/斑点。以生物素标记的pST-B14和pST-B5为探针检测感染PSTV的马铃薯植株提取汁液。可测出的最高稀释倍数分别为126和162～243。