染料木黄酮对HCMV感染的人星形胶质细胞即刻早期蛋白表达影响

摘要

目的探讨染料木黄酮（Gen）对人巨细胞病毒（HCMV）感染的人星形胶质细胞（AS）即刻早期蛋白72（IE72）表达的影响。方法选取对数生长期的AS进行以下实验。HCMV组：HCMV感染AS;Gen组：用含40μmol/L的Gen与含体积分数0.02的FBS的DMEM/F12培养液培养AS;Gen＋HCMV组：用含40μmol/L的Gen与含体积分数0.02FBS的DMEM/F12培养液预培养AS 4h后,HCMV感染AS;对照组：仅以含体积分数0.02FBS的DMEM/F12培养液培养AS。分别用噻唑蓝（MTT）法检测Gen对AS增殖的影响,Real-time PCR和Western blot方法检测IE72mRNA和蛋白的表达。结果 MTT法检测结果显示,Gen＋HCMV组24、48、72h的吸光度值均高于HCMV组（t=5.94～12.99,P〈0.05）。48h时,HCMV组细胞有明显的细胞病变效应（CPE）,而Gen＋HCMV组细胞状态良好,CPE不明显。Western blot方法检测结果显示,Gen＋HCMV组IE72蛋白表达水平低于HCMV组（t=4.90～7.67,P〈0.05）。Real-time PCR结果显示,感染24、48、72和96h时,Gen＋HCMV组IE72mRNA的表达低于HCMV组（t=9.70～18.61,P〈0.05）。结论适当浓度的Gen能抑制HCMV感染所致的AS异常增殖,并抑制IE72蛋白的表达。