疏肝健脾补肾方对乙型肝炎病毒转基因小鼠脾T淋巴细胞及病毒载量的影响

摘要

目的观察疏肝健脾补肾方对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)转基因(transgenic,Tg)小鼠脾T淋巴细胞及病毒载量的影响,探讨其抗病毒疗效及作用机制。方法 60只SPF级BALB/C雄性小鼠,设10只HBV非Tg小鼠为正常对照组,50只HBVTg小鼠随机分为模型组、阿德福韦(ADV)组及中药小、中、大剂量组,每组10只。中药小、中、大剂量组分别给予疏肝健脾补肾方10、20、40g生药/kg灌胃;ADV组给予ADV50mg/kg灌胃;正常对照组和模型组以等量灭菌等渗生理盐水灌胃,均每天1次,连续21天。采用实时荧光PCR定量检测HBVTg小鼠给药前1天(T0)、给药后10天(T1)、21天(T2)、停药后3天(T3)血清HBVDNA;采用ELISA法检测其T3时血清HBsAg。流式细胞仪测定所有小鼠脾T淋巴细胞百分比。结果各给药组T0时血清HBsAg均为阳性,T3时ADV组HBsAg转阴数高于中药大剂量组,差异有统计学意义(P<0·01)。与本组T0时比较,给药后中药大剂量组可持续降低HBVDNA含量,差异均有统计学意义(P<0·01);ADV组HBVDNA含量亦逐渐下降(P<0·01),但在T3时有所回升。中药各剂量组及ADV组均可提高CD3+细胞百分比(P<0·05,P<0·01);中药各剂量组均可明显降低CD8+百分比(P<0·01)。与其他给药组比较,中药大剂量组CD4+、CD4+/CD8+升高,CD8+降低,差异均有统计学意义(P<0·01)。中药中剂量组CD3+及中药大剂量组CD4+、CD8+、CD4+/CD8+均与本组给药前后HBVDNA滴度减少呈显著正相关(r=0·654,P<0·05;r=0·53,r=0·79,r=0·80,P<0·01)。结论疏肝健脾补肾方具有抑制HBVTg小鼠HBVDNA复制的能力,改善T淋巴细胞亚群的异常,提高机体免疫功能可能是其抗HBV的机制之一。