人P56蛋白及其各种缺失突变体酵母表达质粒的构建及鉴定

摘要

目的　构建干扰素诱导蛋白P5 6及其各种缺失突变体的酵母表达质粒。方法　干扰素诱导HT10 80 ,提取mRNA、RT -PCR获取P5 6全长及各种缺失突变体的cDNA ,以酵母表达质粒pGADT7为载体 ,构建重组质粒。结果　诱导的HT10 80中抽提出P5 6的mRNA、RT -PCR扩增出P5 6全长cDNA片段 ,大小与预期值一致约 15 0 0bp ,以P5 6全长cDNA为模板PCR获得P5 6各种缺失突变体并插入pGADT7;正确构建了各种pGADT7 P5 6酵母表达重组质粒。这些质粒DNA测序结果与理论值一致。结论　P5 6全长及各种缺失突变体酵母表达质粒的成功构建 ,为进一步研究P5