应用逆转录——聚合酶链反应快速诊断临床标本登革病毒血清型

摘要

用改良的碘化钠法提取登革热患者血清中登革病毒核糖核酸（DEN－RNA）作为模板，通过逆转录反应（RT）合成cDNA，在DEN型特异引物，TaqDNA多聚酶作用下，对DEN的E基因特异片段进行体外扩增。应用琼脂糖凝胶电泳，EB染色检测扩增结果；以地高辛配基标记的型特异cDNA探针与扩增产物作Southern转印和斑点杂交鉴定扩增产物的特异性，可在2天内直接检出登革热患者血清中DEN－RNA，并确定其血清型。本文用RT－PCR检测16份登革热患者血清，15份检出DEN1，4份同时检出DEN1和DEN2，结果提示1991年广州市流行的登革热可能是由DEN1和DEN2引起的。