曲古霉素A体外诱导膀胱癌细胞凋亡及细胞周期阻滞的机制探讨

摘要

目的:观察组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂曲古霉素A(TSA)对体外培养膀胱癌细胞生长情况及相关基因表达的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:MTT法检测不同浓度(0.05、0.1、0.2、0.4、0.8μmol/L)的TSA对人膀胱癌T24细胞生长的影响。透射电镜观察TSA(0.4μmol/L)诱导后膀胱癌细胞的形态学变化;流式细胞术检测处理后膀胱癌细胞周期分布及凋亡率的变化;Western印迹法检测处理后膀胱癌细胞组蛋白乙酰化水平的变化;FQ-PCR检测处理后膀胱癌细胞p21CIP1/WAF1c、yclin A和cyclin E mRNA的表达。结果:TSA体外能明显抑制T24细胞生长,且抑制作用呈明显的剂量、时间依赖性。TSA(0.4μmol/L)诱导后,透射电镜下可见大量具有凋亡形态特征的T24细胞;流式细胞术检测示细胞阻滞于G0/G1期,并且出现典型的亚二倍体(Sub-G1)峰;TSA可明显提高组蛋白乙酰化水平,并诱导p21CIP1/WAF1的mRNA表达和抑制cy-clin A的mRNA表达,而对cyclin E无明显作用。结论:TSA可通过诱导细胞凋亡及细胞周期阻滞而发挥体外抗膀胱癌作用,其作用机制可能涉及组蛋白乙酰化水平以及相关基因(p21CIP1/WAF1、cyclin A)表达的调控。