曲古抑菌素A和卡介苗诱导膀胱癌BIU-87细胞周期阻滞的研究

摘要

目的观察曲古抑菌素A（TSA）和卡介苗（BCG）及两者联合对人膀胱癌BIU-87细胞周期及相关基因表达的影响,并探讨其作用机制。方法采用噻唑蓝（MTT）法检测细胞生长抑制率,流式细胞术检测细胞周期分布的变化,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测细胞p27kip1、细胞周期素（Cyclin）D1 mRNA表达的变化,Western blot检测细胞p27kip1、Cyclin D1蛋白水平的变化。结果TSA和BCG及两者联合应用能明显抑制BIU-87细胞生长,呈时间和剂量依赖,相对中高剂量两者联用表现为协同作用。TSA和BCG能诱导BIU-87细胞G0/G1期阻滞,对照组G0/G1期细胞比例为（44.39±3.42）%,而TSA联合BCG组G0/G1期细胞比例达（78.3±4.12）%（P＜0.05）。RT-PCR结果示TSA和BCG及两者联用能显著诱导p27kip1mRNA的表达和显著抑制Cyclin D1mRNA的表达,两者联合与单用比较差异有统计学意义（P＜0.05）;Western blot进一步在蛋白水平证实了上述结果。结论 Cyclin D1的表达下降和p27kip1的表达上调共同使细胞阻滞于G0/G1期,这表明TSA和BCG可通过诱导细胞周期阻滞而发挥体外抗膀胱癌作用,其作用机制可能涉及相关基因p27kip1、Cyclin D1表达的调控。