辅酶Ⅰ对缺血再灌注损伤诱导L02肝细胞凋亡的影响

摘要

目的研究辅酶Ⅰ(NADH)对体外培养正常肝细胞系L02缺血再灌注损伤模型的保护作用。方法实验分组:(1)正常对照组(control组);(2)缺血再灌注损伤组(I/R组),即用模拟缺氧液及复氧液处理;(3)NADH+缺血再灌注损伤组(NADH+I/R组),即先加NADH(终浓度为400 μg/ml)后再进行缺血再灌注处理。流式细胞术观察细胞处理后1、6、12、18、24 h凋亡率及12 h时p16、p21、p53和Bcl-2蛋白表达。透射电镜观察细胞超微结构。结果NADH可明显抑制缺血再灌注损伤诱导的肝细胞凋亡,并且能够上调Bcl-2蛋白表达,下调p53、p16、p21蛋白表达,差异显著(P<0.01);透射电镜下可见典型的细胞凋亡特征。结论NADH对缺血再灌注损伤的L02肝细胞有明显的保护作用,其作用机制可能与通过调节Bcl-2家族蛋白及p16、p21、p53蛋白有关。