不同影响因素对水牛原始生殖细胞分离培养的影响

摘要

探讨了不同影响因素（性别、胎龄、分离方法）对水牛原始生殖细胞（PGCs）分离培养的影响。结果显示：PGCs多层堆积生长形成克隆,该克隆具有明显的边界与饲养层区分;PGCs表达AKP和OCT-4;公胎牛组的克隆总数和克隆直径都显著高于母胎牛组,（179和32,（227.76±83.84）μm和（102.34±40.59）μm）,P〈0.05;在原代克隆数目上,80～90 d组只有16个克隆,显著低于其他各组（P〈0.05）,在克隆直径上,80～90 d组为（190.63±65.11）μm,也显著低于除70～80 d组外的其他各组（P〈0.05）,并且在最高传代数上,80～90 d组仅为3代,而其他各组都达到或超过了6代;机械分离组在克隆总数和直径上都显著高于胰酶消化组,（186和30,（216.95±77.41）μm和（140±38.76）μm）,P〈0.05,并且机械分离组的最高传代数为8代,而酶消化组仅为3代。结果表明,本试验分离培养出的水牛PGCs具有与已经分离培养出来的其他物种PGCs相似的生物学特性;公胎牛、胎龄小于80 d以及使用机械分离方法更利于水牛PGCs的分离培养。