蛋白激酶C在糖基化终末产物介导结肠平滑肌细胞内钙离子浓度中的作用

摘要

目的:探讨糖基化终末产物(advanced glycation end products,AGEs)对结肠平滑肌细胞内钙离子浓度的影响及可能机制.方法:酶解法分离培养SD大鼠结肠平滑肌细胞(smooth muscle cell,SMC),α-actin免疫荧光鉴定;激光共聚焦显微镜检测(SMC)钙闪烁;蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)活性检测试剂盒检测细胞PKC活性.结果:细胞免疫荧光鉴定大鼠结肠SMC.不同浓度AGEs(50、100μg/mL)刺激结肠SMC后,与对照组比较,钙离子浓度显著降低(56.7%±3.6%、78.6%±5%vs 99.6%±3.1%,P<0.05,P<0.01),50μg/mL为体外最大有效浓度.与对照组相比,AGEs(50、100μg/mL)升高细胞内PKC活性.PKC抑制剂chelerythrine可阻断A G E s介导的钙离子浓度降低(70.7%±3.7%vs 87.1%±2.5%,P<0.05).结论:AGEs可激活PKC通路、从而降低胞内钙离子的浓度,最终抑制大鼠结肠平滑肌收缩.