乳腺癌HER2基因扩增检测方法——显色原位杂交法的应用及优化

摘要

目的：应用显色原位杂交技术（chromogenic in situ hybridization，CISH）检测乳腺癌组织人表皮生长因子受体2（hu—man epidermal growth factor receptor 2，HER2）基因扩增情况，并对操作方法进行优化。方法：选择免疫组织化学（IHC）En—Vision法检测结果2＋及以上的60例乳腺癌组织作为研究对象，应用CISH技术检测其HER2基因扩增情况，分析二者结果的相关性；总结CISH操作经验，优化操作方法。结果：44例标本IHC检测HER2蛋白表达为3＋，其中40例CISH检测呈现HER2基因高倍扩增，4例无扩增；基因扩增与蛋白表达的符合率为91％。16例IHC检测HER2表达为2＋标本基因扩增与蛋白表达的符合率为50％。IHC与CISH符合率为80％（48／60），二者明显相关（P〈0．01）。操作过程中应严格控制切片厚度，一般要求4～5μm；杂交变性一定要彻底，杂交后的洗涤温度和时间也很重要，最好控制在70～75℃；要严格控制苏木精衬染时间；每次实验最好有阳性对照片，可以有效进行质量控制。结论：CISH检测乳腺癌HER2基因扩增的结果与IHC检测的蛋白表达结果符合率较高，可作为乳腺癌HER2基因检测的一项新技术；但在具体操作时，应注意严格控制切片厚度、消化及杂交后洗涤温度与时间以及苏木精衬染时间等因素。