性逆转石斑鱼脑垂体差异表达基因克隆的筛选

摘要

以 1 7 α甲基睾丸酮投喂赤点石斑鱼 (Epinephelusakaara) ,成功地获得了性逆转的有功能的雄鱼。用SMARTcDNA合成和长片段PCR技术构建了性逆转前后脑垂体cDNA文库 ;用抑制消减杂交技术建立了性反转前后抑制性差减文库。对获得的 5 60个雄鱼脑垂体PCR阳性克隆和35 0个雌鱼脑垂体PCR阳性克隆进行斑点杂交 ,共筛选到 1 0 3个差异表达cDNA片段。对其中2 9个克隆进行了测序 ,与GenBank中的已知基因序列进行同源性比较 ,发现有 6个片段为促性腺激素α亚基前体基因 (GenBank注册号 :AY2 0 7430 ) ,与同属不同种的石斑鱼促性腺激素α亚基前体基因有 97%的同源性 ;1个片段为生长激素前体 (GenBank注册号 :AY2 0 7431 ) ,与同属不同种的石斑鱼生长激素前体基因有 99%的同源性 ;其余 2