改良抗体捕获ELISA方法检测流行性出血热特异性IgE、IgA、IgG抗体的初步研究

摘要

初步报道建立了一种检测流行性出血热(EHF)特异性IgE、IgA、IgG抗体的改良抗体捕获ELISA方法(EacELISA,AacELISA,GacELISA)。该法以抗人IgE、IgA或IgG单克隆抗体作包被抗体;酶标记物系两株组特异性较强的EHF·McAb(A_(35),A_(25-1)株);在实验中采用EHF病毒抗原与酶标记物混合后一次加入,而不是分别依次加入的方式,使操作步骤简化,实验时间缩短,又适当提高了试验敏感性。该法具有简便,特异性高,灵敏度较高(检测EHF·IgE,EHF·IgA>1:100;EHF·IgG>1:2560),重复性较好(CV:EHF·IgE 2.51％,EHF·IgA 11.80％,EHF·IgG 10.85％)等优点。检测39份EHF病人血清,急性期病人(3～7病日)血清三种抗体的检出率分别为84.21％(16/19,EHF·IgG),89.47％(17/19,EHF·IgA)和100％(19/19,EHF·IgG);而发病3～6月后患者血清三种抗体检出率分别为10.00％(2/20),45.00％(9/20)和100.00％。在急性期与恢复期病人之间,EHF·IgE和EHF·IgA两种抗体的检出率差异较显著(P<0.01)。70价其他人群血清三种抗体检出率均为阴性。