在长期保存的DNA模板中用双重式PCR检测鼠疫特异性基因的结果分析

摘要

目的了解鼠、蚤材料DNA模板长期保存后鼠疫菌特异性基因的检出率。方法应用双重式PCR技术,以鼠疫菌特异性基因Pla和Fra作为引物,进行PCR实验,比较DNA模板在-20℃冰箱保存3d和5年的检测情况。结果实验感染的动物脏器模板,检出阳性率从100%降到25.00%,印鼠客蚤和缓慢细蚤的模板检出阳性率分别从100%降为16.22%和23.33%;现场采集的22份动物脏器模板阳性率从100%降为22.73%;纯菌模板对照阳性率100%。结论鼠疫PCR阳性检出率与模板中的鼠疫菌含菌量及模板保存的时间有关。