高效液相色谱法同时测定小鼠脑组织中乳酸与磷酸肌酸含量

摘要

目的:建立同时测定小鼠脑组织中乳酸(LA)与磷酸肌酸(CP)含量的反相高效液相色谱法.方法:样本经研磨抽提、过滤后,以hypersil BDS C18为色谱柱;220 mmol/L 磷酸二氢钾/磷酸氢二钾缓冲液(pH6.7)、内含 6 mmol/L 四丁基氢氧化铵为流动相;流速 0.8 ml/min;紫外检测器于 210 nm 波长检测.结果:当乳酸与磷酸肌酸的摩尔浓度分别为 87～2784 μmol/L、9.8～306 μmol/L 时,其峰面积与摩尔浓度的线性关系良好;最低检测限分别为:43.2 μmol/L、2.4 μmol/L,日内相对标准偏差(RSD)分别为 6.0%、3.7%(n=5);日间相对标准偏差分别为 10.4%、9.3%(n=5);平均加标回收率分别为 95%、97%.结论:该方法灵敏,稳定性好,已成功应用于正常和缺血小鼠脑组织中乳酸与磷酸肌酸含量的同时测定.