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伯氏疟原虫青蒿素抗性相关的消减cDNA文库构建

         

摘要

目的 构建伯氏疟原虫青蒿素抗性相关的消减cDNA文库。 方法 提取伯氏疟原虫K173株 (NS)与青蒿素抗性株 (AR)的总RNA ,superSMART法合成双链cDNA ,分别以NS为消减方 (driver) ,AR为试验方 (tester)及AR为driver ,AS为tester进行双向抑制性消减PCR(SSHPCR)。富集的差异表达cDNA克隆到pMD18 T载体构建消减文库。 结果 NS AR和AR NS消减文库分别获得 3 95个和 5 0 6个阳性克隆 ,从NS AR和AR NS文库中随机挑取 10 8个克隆PCR鉴定 ,分别有 10 0个和 10 4个含插入片段 ,大小在 0 .2 5~ 2kb之间。 结论 成功构建了伯氏疟原虫青蒿素抗性相关的消减cDNA文库。

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